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单精子卵浆内注射(ICSI)，俗称第二代试管婴儿技术的诞生，颇具传奇色彩。犹如一部精彩纷呈的武侠小说，情节跌宕起伏，人物豪杰辈出。男科医师杨晓玉为您讲述这项技术的来龙去脉，请各位看官关注。 ICSI的来历和概念 单精子卵胞浆内注射(Intracytoplasmic sperm injection, ICSI)主要适应症是精子参数严重异常和精卵结合障碍。IVF技术问世后十几年间，研究者一直在试图解决精子过少、活力很低和畸形率过高导致的IVF受精率很低甚至完全不受精的问题。经历过很多年的努力和很多次的失败，研究者尝试透明带下授精法(SUZI)，部分透明带切除(PZD)，如下图所示，但二者正常体外正常受精率均不足20%，临床妊娠率不足10%。
直到1991年，运气降临到了比利时布鲁塞尔大学附属生殖中心的Gianpiero Palermo身上，他的上级领导是Paul Devroey 和Andre Van Steirteghem，后来这三人都成为生殖医学界的大牛。在Gianpiero Palermo之前，研究者们仍然不太敢于尝试将精子直接注入卵浆内，担心损伤卵子。大家仍在想尽办法改进SUZI和PZD技术，比如通过诱导精子获能和发生顶体反应提高受精率。 关于为何只有他走出了这关键一步，听到几个版本的传说。有人说他是偶然把精子注入卵胞浆内，有人说他是误将精子注入卵胞浆内，也有人说他初生牛犊不怕虎，想试试的没想到就成功了，更有好事者说是他手下一个留学的中国籍博士生刘家恩误打误撞做的ICSI。不管如何Palermo先生成功了，1992世界第一例ICSI试管婴儿的文章发表在著名的柳叶刀杂志上(我这一辈子要是能发一篇就心满意足了)。后期ICSI技术又得到进一步改进，特别是ICSI前的精子制动可以提高显著ICSI受精率。 ICSI发明后在临床上得到了快速广泛的应用，由于目前认为ICSI是一项安全的技术，导致很多非男性因素也在越来越多的使用ICSI。美国疾控中心(CDC)报道称过去2001-2010年这十年间美国的ICSI增长迅速，由40432例增至66859例(左图)，同期IVF和ICSI总周期数则从107587例增至147,260例(右图)，ICSI占比从37.5%增至45.4%。
ICSI直接将精子注射到卵子内部，跨越了诸如精子游动，精卵结合，顶体反应等一系列步骤(下图)，从而提高严重少弱畸精症的体外受精成功率，给男性不育患者带来了生育的希望，具体内容可以阅读本公众号此前发表的“卵子小妹向您讲述她的ICSI旅程”，文章采用拟人笔法娓娓道来，风格清新自然，值得一读。 没有人想到ICSI如此简单的解决严重少弱精症的受精问题，正所谓大道至简。但目前ICSI成功率仍然不高，2010年国外一篇文献综述总结ICSI的活产率和临床妊娠率分别只有25%和35%。所以研究者们又走在探索提高ICSI成功率的路上。
ICSI对精子的要求 精子分为头部，体部，尾部，作为单倍体细胞，非常微小，长约50 微米，头部呈椭圆形，长约3.5-5.0微米，宽约2.5-3.2微米，长宽比大致为1.3-1.8。ICSI挑选精子，第一要求是活精子，最好是前向运动精子，特殊情况如完全不动精子症(精子纤毛不动综合征)可以通过低渗肿胀实验来挑选存活的精子;其次，尽可能挑选形态正常的精子(要挑帅哥)，且不能对精子进行HE染色(细胞和组织病理学常用染色方法)。 有经验的实验室技术员可以在200-400倍光镜下通过观察精子头、体和尾部挑选到合格精子，淘汰比如尖头、小头、不规则头、大头、双头、圆头、卷尾、颈部异常的精子;但一些锥形头，顶体偏小的精子认为可以行ICSI治疗，且不影响囊胚形成率和临床妊娠率。这种挑选精子的方法由于无法精确观察精子，有一定的主观性和随意性。研究者一直在努力寻找一种既安全有能提供成功率的优选精子的方法。唉，只要世界上有问题存在，科学家的狂热永远不会冷却。 |
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随着不孕不育症的高发，试管婴儿技术也被广泛应用，而第一代与第二代试管婴儿临床应用比较常见，但是很多不孕不育患者都不太了解第二代试管婴儿，因此想知道，第二代试管婴儿的过程跟适应症?下面就让我们一起来了解。
第二代试管婴儿过程：在ICSI技术中促排卵，胚胎培养，胚胎移植等步骤与常规IVF相同，值得注意的是“ICSI婴儿”和“试管婴儿”受孕几率并无差别。单精子卵胞浆内注射最初用于严重男性不育，由于其受精率比常规体外受精高，所以目前应用范围也逐渐扩大到既往体外授精失败、不明原因的不育，甚至用于大龄男性。这项技术现已为许多不育男性带去孕育的希望。 第二代试管婴儿技术是在体外受精-胚胎移植(IVF-ET/第一代试管婴儿)基础上发展起来的显微受精技术，直接将精子注射入卵母细胞胞浆内，达到助孕目的。ICSI使男性不育症的治疗取得巨大突破,它能使精子越过卵子透明带直接进入卵胞浆内，克服精子穿透卵透明带过程中的多重障碍，从而获得良好的受精率，在治疗男性不育症上，试管婴儿中的应用越来越广泛。 |
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了解过试管婴儿的人都知道，国内医院在做试管婴儿时，最常用的两种授精方式是常规体外受精(IVF)和单精子卵泡浆内注射(ICSI)。从整体流程来说的话，IVF和ICSI授精的卵子，在受精以后的胚胎发育过程环节都是一样的，只是实验室的胚胎学家们的授精方式不一样。
因此，当女性促排卵之后只能取到2-3个卵子之后，就很纠结卵子的受精方式了。毕竟，看起来，ICSI能够保证受精率。然而数据显示，卵巢储备功能减退的患者，在男方精子达标的情况下，IVF和ICSI的受精率相当，同时，移植后的流产率跟活产率也是相等的。 不过，国内的生殖医生建议：在男方精子正常、足够的前提下，还是采取IVF-ET技术，让精卵自由受精，这样不会破坏大自然的优胜劣汰原则，而准父母们也不要过多的干涉它们，我们只需用安心的准备好宝宝们的生长的环境，迎接宝宝的到来。 |
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卵细胞浆内单精子注射技术俗称第二代试管婴儿，这一技术的出现让很多不孕不育患者重新看到孕育的希望，但是很多人对此项技术的了解不深，例如，第二代试管婴儿技术的治疗过程?
专家表示：第二代试管婴儿的治疗过程与常规试管婴儿的治疗过程大致是相同的，只是在体外授精的过程上有所差异。首先，要对女性进行促排卵治疗，提供多个卵子供受精培育，然后需要男性提供精子。通常采取第二代试管婴儿治疗的男性，精子的数量非常少，甚至在精液中采集不到任何精子，需通过特殊手术取得可用的精子。睾丸穿刺取精就是一种比较常见的方式，这需要在麻醉状态下通过穿刺针穿透睾丸取出精子。 男性取精当天女性需进行取卵手术，这个过程一般是在局部麻醉或全身静脉麻醉下进行的，患者无需担心太过疼痛的问题，一般采用B超引导下阴道穿刺取卵。而精卵取出后，卵子需培育几个小时，待时机成熟进行体外受精。第二代试管婴儿的特色在于可以解决体外环境中难以自行受精的情况，将好的精子直接用特殊针头注入卵母细胞中，强行使其完成受精，受精卵发育成早期胚胎后应进行胚胎移植，这个过程与常规试管婴儿是一样的，按照患者的具体情况选择胚胎移植的数量进行移植。 |
